Travaux pratiques de contrôle qualité (partie 7/8)

## Objectifs et prérequis **Objectifs** - Réaliser un titrage conductimétrique par précipitation et déterminer la concentration d’un analyte à partir du point d’équivalence. - Expliquer le principe de la chromatographie, définir le facteur de rétention (Rf) et le facteur de séparation (α). - Mettre en œuvre une séparation chromatographique d’un mélange (colonne ou TLC) et interpréter les fractions obtenues. - Appliquer les règles de sécurité et d’hygiène propres aux manipulations de réactifs chimiques et de solvants au Cameroun. **Prérequis** - Notions de solution, de conductivité électrique et de conductivité molar. - Équilibres de précipitation (produit de solubilité Ksp). - Concepts de polarité, de phases stationnaire/mobile et de répartition des composés. - Consignes de base de sécurité en laboratoire (port des EPI, gestion des déchets). --- ## Introduction contextualisée Au Cameroun, le contrôle qualité intervient dans de nombreux secteurs : potabilisation de l’eau (analyse des chlorures), industrie agroalimentaire (vérification de la pureté des sucres, des additifs), pharmaceutique (contrôle des principes actifs) et environnementale (détection de polluants). Les méthodes conductimétriques et chromatographiques offrent des réponses rapides, peu coûteuses et adaptées aux laboratoires de région. Ce chapitre présente les deux techniques au programme de la Terminale F6, en insistant sur les gestes professionnels, les calculs nécessaires et les précautions à observer. --- ## I. Titrage conductimétrique par précipitation ### 1. Définition et principe > **Titrage conductimétrique** : méthode qui mesure la variation de la conductivité électrique (κ) d’une solution en fonction du volume de titrant ajouté. Lors d’une précipitation, les ions responsables de la conductivité sont retirés de la solution sous forme de solide, ce qui provoque une baisse de κ jusqu’au point d’équivalence. Réaction type (exemple classique) : \[ \text{Ag}^+_{(aq)} + \text{Cl}^-_{(aq)} \rightarrow \text{AgCl}_{(s)}\downarrow \] Avant l’équivalence, chaque mole d’Ag⁺ ajoutée retire une mole de Cl⁻, diminuant ainsi κ. Après l’équivalence, l’excès d’Ag⁺ augmente à nouveau la conductivité. Le point d’intersection de deux droites linéaires (avant et après équivalence) donne le volume d’équivalence (Veq). ### 2. Relations fondamentales La conductivité d’une solution électrolyte est donnée par : \[ \kappa = \sum_i \lambda_i \, c_i \] où λi est la conductivité molaire de l’ion i (S·cm²·mol⁻¹) et ci sa concentration (mol·L⁻¹). Pour une réaction 1 : 1, la concentration de l’analyte (Cₐ) s’obtient par : \[ Cₐ = \frac{C_t \, V_t}{Vₐ} \] avec Ct = concentration du titrant, Vt = volume de titrant à Veq, Va = volume de l’échantillon. ### 3. Exemple chiffré entièrement résolu **Objectif** : déterminer la concentration de chlorure dans un échantillon d’eau de forage (Yaoundé). - Titrant : solution d’AgNO₃ étalonnée à 0,100 mol·L⁻¹. - Volume d’échantillon : Va = 25,0 mL. - Mesures de conductivité (κ, en mS·cm⁻¹) : | V AgNO₃ ajouté (mL) | κ (mS·cm⁻¹) | |---------------------|------------| | 0,0 | 12,5 | | 5,0 | 10,8 | | 10,0 | 9,2 | | 15,0 | 7,9 | | 20,0 | 6,8 | | 25,0 | 6,0 | | 30,0 | 5,8 | | 35,0 | 6,5 | | 40,0 | 7,4 | Le tracé κ versus V montre deux droites : - Avant équivalence (0‑25 mL) : pente ≈ –0,26 mS·cm⁻¹·mL⁻¹, ordonnée à l’origine ≈ 12,5. - Après équivalence (30‑40 mL) : pente ≈ +0,16 mS·cm⁻¹·mL⁻¹, ordonnée à l’origine ≈ 1,0. Intersection obtenue à V_eq ≈ 27,4 mL. Calcul de la concentration de Cl⁻ : \[ C_{Cl^-} = \frac{0,100\ \text{mol·L}^{-1} \times 27,4\ \text{mL}}{25,0\ \text{mL}} = 0,110\ \text{mol·L}^{-1} \] Ainsi, l’eau contient 0,110 M de chlorure, soit ≈ 3,9 g·L⁻¹ (MCl = 35,45 g·mol⁻¹). ### 4. Procédure pas à pas (atelier) 1. Préparer une solution d’AgNO₃ 0,100 M, vérifier son titre par titration d’une solution NaCl étalon. 2. Rincer la burette à l’eau distillée puis avec une petite quantité de titrant. 3. Mesurer 25,0 mL d’échantillon dans un bécher de 100 mL, y plonger l’électrode de conductivité (cellule à deux électrodes, constante de cellule connue). 4. Noter κ₀ (conductivité initiale). 5. Ajouter le titrant par fractions de 0,5 mL, agiter 20 s, attendre la stabilisation de κ (≈ 30 s) et enregistrer la valeur. 6. Tracer κ versus V sur papier millimétré ou avec un tableur, déterminer les deux droites linéaires et leur intersection. 7. Appliquer la formule de concentration ci‑dessus. 8. Nettoyer l’électrode à l’eau distillée, la sécher avec un chiffon non pelucheux. ### 5. Normes de sécurité et d’hygiène > **Porter lunettes de protection, blouse et gants nitrile** lorsqu’on manipule l’AgNO₃ (toxique, risque de taches cutanées). > **Éviter toute inhalation de poussières** : travailler sous hotte ou dans un espace bien ventilé. > **Collecter les résidus d’AgNO₃** dans un récipient dédié aux déchets métalliques (conformément au décret camerounais sur la gestion des déchets dangereux). > **Rincer immédiatement** toute projection cutanée à l’eau abondante pendant au moins 15 s. --- ## II. Analyse chromatographique : principe ### 1. Définition > **Chromatographie** : technique de séparation basée sur la répartition différentielle d’un composé entre une phase stationnaire (immobile) et une phase mobile (en mouvement). Le composé passe plus ou moins de temps dans chaque phase selon son affinité, ce qui entraîne une migration différée. ### 2. Types usuels en laboratoire de contrôle qualité | Type | Phase stationnaire | Phase mobile | Application typique | |------|-------------------|--------------|---------------------| | TLC (couche mince) | Silice GF254 sur plaque aluminium | Solvant organique (ex. éthanol/acétate d’éthyle) | Contrôle rapide de pureté, suivi de réaction | | Colonne ouverte | Silice, alumina | Solvants de polarité variable (hexane → éthylacétate) | Séparation préparative de mg à g | | HPLC | C18 (phase inverse) ou silice (phase normale) | Mélange eau/acétonitrile, gradient | Quantification de principes actifs, résidus de pesticides | | GC | Colonne capillaire (polysiloxane) | Gaz hélium ou azote | Analyse de composés volatils (huiles essentielles, solvants) | ### 3. Facteur de rétention (Rf) en TLC \[ R_f = \frac{d_{\text{composé}}}{d_{\text{solvant}}} \] où d_composé est la distance parcourue par le centre de la tache et d_solvant la distance du front du solvant (ligne de départ au sommet de la plaque). ### 4. Facteur de rétention (k’) et sélection en colonne \[ k' = \frac{t_R - t_0}{t_0} \] - t_R : temps de rétention du composé. - t_0 : temps mort (temps d’un composé non retenu, souvent le solvant). Le **facteur de séparation** (α) entre deux composés 1 et 2 : \[ \alpha = \frac{k'_2}{k'_1}\quad (\alpha > 1) \] La **résolution** (Rs) : \[ R_s = \frac{\sqrt{N}}{4}\,\frac{\alpha-1}{\alpha}\,\frac{k'_2}{1+k'_2} \] avec N le nombre de théorèmes de plaque (N = 16 (t_R/W_b)², W_b = largeur à la base du pic). ### 5. Exemple chiffré – TLC d’un extrait de plante médicinale **Objectif** : vérifier la présence de deux flavonoïdes (quercétine et kaempférol) dans un extrait de *Moringa oleifera* utilisé dans un complément alimentaire vendu à Douala. - Plaque TLC : silice GF254, 20 × 20 cm. - Système solvant : éthanol/acétate d’éthyle (7 : 3, v/v). - Dépose : 2 µL d’extrait, 2 µL de quercétine référence, 2 µL de kaempférol référence. - Développement : jusqu’à ce que le solvant monte à 1 cm du haut de la plaque (≈ 15 min). - Visualisation : lampe UV 254 nm (les flavonoïdes apparaissent en fluorescence bleue). Mesures (en mm) : | Substance | d_composé | d_solvant | Rf | |-----------|-----------|-----------|----| | Quercétine | 45 | 80 | 0,56 | | Kaempférol | 58 | 80 | 0,73 | | Extrait (tache principale) | 46 | 80 | 0,58 | | Extrait (tache secondaire) | 57 | 80 | 0,71 | Les Rf de l’extrait coïncident avec ceux des références → présence des deux flavonoïdes. ### 6. Procédure pas à pas (TLC) 1. Préparer la plaque TLC, la chauffer 10 min à 110 °C pour activer la silice. 2. Avec un capillaire, déposer délicatement les échantillons et les références à 1,5 cm du bas de la plaque. 3. Placer la plaque dans une cuve contenant le solvant préalablement saturé (feuille de papier filtre imbibé). 4. Fermer la cuve, laisser le solvant monter par capillarité jusqu’à la hauteur souhaitée. 5. Retirer la plaque, la laisser sécher à l’air libre. 6. Visualiser sous UV ou avec un révélateur (iode, spray d’acide sulfurique dilué). 7. Mesurer les distances, calculer les Rf, comparer aux références. ### 7. Normes de sécurité et d’hygiène > **Utiliser une hotte** lors de la préparation et de l’évaporation des solvants organiques (éthanol, acétate d’éthyle) afin d’éviter l’inhalation de vapeurs. > **Porter gants résistants aux solvants** (nitrile ou néoprène) et lunettes de protection. > **Éviter les flammes nues** près des solvants volatils. > **Collecter les déchets solvantés** dans des contenants étiquetés « solvants organiques » pour traitement conforme à la réglementation camerounaise. --- ## III. Séparation chromatographique d’un mélange ### 1. Objectif Séparer les composants d’un mélange complexe afin de les identifier ou de les quantifier individuellement (ex. contrôle de la pureté d’un sirop de sucre de canne, détection de résidus de pesticides dans des céréales). ### 2. Méthodes courantes | Méthode | Phase stationnaire | Phase mobile | Plage d’application | |---------|-------------------|--------------|---------------------| | Colonne ouverte (silice) | Silice 60 Å, 230‑400 mesh | Mélange hexane/éthylacétate, gradient de polarité | Séparation préparative de composés de moyenne polarité | | HPLC en phase inverse | C18 (octadécylsilane) | Eau/acétonitrile avec gradient (0‑100 % ACN) | Analyse de composés polarité moyenne à faible (vitamines, alcaloïdes) | | HPLC en phase normale | Silice | Solvants apolarisants (hexane, isopropanol) | Séparation d’isomères, de lipides | ### 3. Étapes d’une séparation en colonne ouverte 1. **Conditionnement** : faire passer 5 volumes de solvant initial (ex. hexane) pour éliminer les impuretés et égaliser la pression. 2. **Chargement** : dissoudre le mélange dans le minimum de solvant initial (souvent 0,5 mL pour 0,5 g de produit) et le déposer en bande sur le dessus de la colonne à l’aide d’une pipette ou d’une seringue. 3. **Élution** : commencer avec le solvant le moins polar (hexane) puis augmenter progressivement la proportion de solvant plus polar (éthylacétate) selon un gradient prédéfini (ex. 0 % → 50 % EA en 20 mL). 4. **Collecte des fractions** : recueillir des aliquots de 5 mL dans des tubes marqués, en suivant le profil de collecte (ex. fractions 1‑4 = hexane pur, 5‑8 = 10‑30 % EA, etc.). 5. **Analyse des fractions** : TLC, spectrophotométrie UV‑Vis, ou mesure de conductivité selon la nature des composés. 6. **Regroupement** : réunir les fractions contenant le composé pur, évaporer le solvant sous réduit, sécher le résidu. ### 4. Exemple chiffré – séparation d’un mélange de deux composés sur colonne de silice **Mélange** : 0,50 g contenant 60 % de composé A (plus polaire) et 40 % de composé B (moins polaire). - Colonne : silice 10 g, hauteur 20 cm, diamètre 1 cm (volume ≈ 15,7 mL). - Solvant initial : hexane. - Gradient : hexane/éthylacétate, augmentation linéaire de 0 % à 50 % EA sur 25 mL de volume d’élution. - Détection : TLC (silice, même système solvant) sur chaque fraction de 3 mL. **Résultats (schéma)** : | Fraction | Volume cumulé (mL) | % EA dans le mélange | Présence A (TLC) | Présence B (TLC) | |----------|-------------------|----------------------|------------------|------------------| | 1‑4 | 0‑12 | 0‑16 | – | + (forte) | | 5‑8 | 12‑24 | 16‑32 | + (faible) | + (moyenne) | | 9‑12 | 24‑36 | 32‑48 | + (forte) | – | | 13‑16 | 36‑48 | 48‑64 | + (trace) | – | On observe que le composé B apparaît principalement dans les fractions 1‑8 (faible à moyenne polarité) tandis que le composé A domine les fractions 9‑16 (polarité plus élevée). **Calcul de la récupération** : - Masse récupérée dans fractions 9‑12 (A pur) = 0,28 g. - Théorique attendu pour A = 0,60 × 0,50 g = 0,30 g. - Rendement = (0,28/0,30) × 100 ≈ 93 %. - Masse récupérée dans fractions 1‑4 (B pur) = 0,18 g. - Théorique attendu pour B = 0,40 × 0,50 g = 0,20 g. - Rendement = (0,18/0,20) × 100 = 90 %. ### 5. Procédure pas à pas (atelier – colonne ouverte) 1. Préparer la colonne : placer un bouchon de coton stérile au bas, ajouter la silice préalablement séchée, tapoter pour éliminer les bulles d’air. 2. Conditionner avec 10 mL d’hexane, laisser égoutter jusqu’à ce que le niveau du solvant soit juste au-dessus du lit de silice. 3. Dissoudre le mélange (0,50 g) dans 0,5 mL d’hexane, charger délicatement en haut de la colonne. 4. Commencer l’élution avec de l’hexane pur, collecter des fractions de 5 mL. 5. Après 15 mL d’hexane, passer à un mélange hexane/éthylacétate 90/10, puis augmenter progressivement selon le gradient prévu. 6. Surveiller le débit (≈ 1 mL·min⁻¹) à l’aide d’un chronomètre et d’un récipient gradué. 7. Analyser chaque fraction par TLC (silice, même système solvant que le gradient). 8. Regrouper les fractions pures, évaporer le solvant sous rotovap à 40 °C, sécher sous vide. 9. Nettoyer la colonne : faire passer 2 volumes d’acétone puis 2 volumes d’hexane, retirer la silice et la remplacer si nécessaire. ### 6. Normes de sécurité et d’hygiène > **Vérifier l’intégrité de la colonne** (absence de fissures, de bouchon lâche) avant chaque utilisation pour éviter les projections de silice. > **Porter des gants résistants aux solvants** (néoprène) et des lunettes de protection lors de la manipulation des mélanges hexane/éthylacétate. > **Éviter les surpressions** : ne jamais fermer la sortie de la colonne pendant l’élution ; maintenir un débit régulier. > **Éliminer les solvants usés** dans des contenants dédiés, conformément au décret camerounais sur la gestion des déchets dangereux (éviter le rejet dans les égouts). > **Nettoyer immédiatement** toute projection de silice sur la peau avec de l’eau et du savon ; la silice peut provoquer une irritation mécanique. --- ## Synthèse du chapitre - **Titrage conductimétrique par précipitation** : mesure de κ vs V, point d’équivalence à l’intersection de deux droites, calcul de la concentration via \(Cₐ = \frac{C_t V_t}{Vₐ}\). - **Sécurité** : lunettes, gants nitrile, hotte pour AgNO₃, récupération des déchets argentés. - **Chromatographie – principe** : répartition entre phase stationnaire et mobile, Rf en TLC, k’ et α en colonne, résolution Rs. - **Sécurité TLC/colonne** : hotte pour solvants organiques, gants néoprène, éloignement des flammes, collecte des déchets solvantés. - **Séparation chromatographique d’un mélange** : conditionnement, chargement, élution en gradient, collecte de fractions, analyse par TLC ou spectrophotométrie, regroupement et évaporation. - **Exemple d’application** : dosage des chlorures dans l’eau de forage (conductimétrie) ; contrôle de flavonoïdes dans un extrait de *Moringa* (TLC) ; purification d’un mélange A/B sur colonne de silice. - **Formules clés** : \(\kappa = \sum \lambda_i c_i\) ; \(R_f = d_{c}/d_{s}\) ; \(k' = (t_R-t_0)/t_0\) ; \(\alpha = k'_2/k'_1\) ; \(R_s = \frac{\sqrt{N}}{4}\frac{\alpha-1}{\alpha}\frac{k'_2}{1+k'_2}\). --- ## Glossaire | Terme | Définition | |-------|------------| | Conductimétrie | Mesure de la conductivité électrique d’une solution en fonction de sa composition ionique. | | Titrage | Opération consistant à ajouter progressivement un réactif connu (titrant) à une solution d’analyte jusqu’à atteindre la stoichiométrie de la réaction. | | Précipitation | Formation d’un solide insoluble à partir d’ions en solution lorsque le produit ionique dépasse le Ksp. | | Conductivité molaire (λ) | Conductivité d’une solution contenant 1 mol·L⁻¹ d’un ion, unité S·cm²·mol⁻¹. | | Point d’équivalence | Volume de titrant où les quantités de réactif et d’analyte sont exactement stoichiométriques. | | Chromatographie | Technique de séparation basée sur la répartition différentielle d’un composé entre deux phases. | | Phase stationnaire | Matériau fixe (silice, alumina, C18) qui interagit avec les analytes. | | Phase mobile | Fluide (solvant ou gaz) qui transporte les analytes à travers la phase stationnaire. | | Rf (facteur de rétention) | Rapport de la distance parcourue par un composé à celle du front du solvant en TLC. | | k’ (facteur de rétention) | Mesure de la rétention d’un composé en colonne, \(k' = (t_R-t_0)/t_0\). | | α (facteur de séparation) | Rapport des facteurs de rétention de deux composés, indicateur de leur sélectivité. | | N (nombre de théorèmes de plaque) | Indicateur de l’efficacité d’une colonne, \(N = 16 (t_R/W_b)^2\). | | Rs (résolution) | Capacité d’une méthode à séparer deux pics, fonction de N, α et k’. | | Gradient | Variation programmée de la composition de la phase mobile au cours de l’élution. | | TLC (Thin Layer Chromatography) | Chromatographie sur couche mince, analyse rapide et qualitative. | | HPLC (High Performance Liquid Chromatography) | Chromatographie en colonne à haute pression, quantitative et très sensible. | --- ## Exercices d'application corrigés ### Exercice 1 – Titrage conductimétrique **Situation** Un technicien du laboratoire de contrôle de l’eau de la ville de Garoua doit déterminer la concentration d’ions sulfate (SO₄²⁻) dans un échantillon d’eau de puits. Il utilise une solution de chlorure de barium (BaCl₂) 0,050 M comme titrant, sachant que la réaction de précipitation est : \[ \text{Ba}^{2+} + \text{SO}_4^{2-} \rightarrow \text{BaSO}_{4(s)}\downarrow \] Il mesure la conductivité de l’échantillon (25,0 mL) avant titration : κ₀ = 13,2 mS·cm⁻¹. Après ajout de 10,0 mL de BaCl₂, κ = 10,1 mS·cm⁻¹ ; après 20,0 mL, κ = 7,8 mS·cm⁻¹ ; après 30,0 mL, κ = 6,5 mS·cm⁻¹ ; après 35,0 mL, κ = 6,9 mS·cm⁻¹ ; après 40,0 mL, κ = 7,5 mS·cm⁻¹. **Questions** 1. Déterminer le volume d’équivalence (Veq) à partir des données. 2. Calculer la concentration de SO₄²⁻ dans l’échantillon. 3. Exprimer le résultat en mg·L⁻¹ (masse molaire SO₄²⁻ = 96,06 g·mol⁻¹). **Corrigé** 1. Tracer κ versus V montre deux droites : - Avant équivalence (0‑30 mL) : pente ≈ –0,22 mS·cm⁻¹·mL⁻¹, ordonnée à l’origine ≈ 13,2. - Après équivalence (30‑40 mL) : pente ≈ +0,10 mS·cm⁻¹·mL⁻¹, ordonnée à l’origine ≈ 3,5. Intersection à V_eq ≈ 30,0 mL. 2. Concentration de SO₄²⁻ : \[ C_{SO_4^{2-}} = \frac{C_{\text{BaCl}_2}\,V_{\text{eq}}}{V_{\text{échantillon}}} = \frac{0,050\ \text{mol·L}^{-1} \times 30,0\ \text{mL}}{25,0\ \text{mL}} = 0,060\ \text{mol·L}^{-1} \] 3. Masse par litre : \[ 0,060\ \text{mol·L}^{-1} \times 96,06\ \text{g·mol}^{-1} = 5,76\ \text{g·L}^{-1} = 5760\ \text{mg·L}^{-1} \] **Réponse** : Veq = 30,0 mL ; [SO₄²⁻] = 0,060 M ; 5,76 g·L⁻¹ (5760 mg·L⁻¹). --- ### Exercice 2 – Analyse chromatographique (TLC) **Situation** Un laboratoire de contrôle qualité d’une usine de production de sirop de glucose à Yaoundé souhaite vérifier la présence de maltose et de glucose dans un sirop fini. On réalise une TLC sur plaque silice GF254 avec un système solvant éthanol/acétate d’éthyle (8 : 2, v/v). Les dépôts sont : 2 µL de sirop, 2 µL de référence glucose, 2 µL de référence maltose. Après développement, les distances mesurées (en mm) sont : - Front solvant : 85 - Glucose référence : 38 - Maltose référence : 62 - Tache 1 du sirop : 40 - Tache 2 du sirop : 60 **Questions** 1. Calculer les Rf du glucose, du maltose et des deux taches du sirop. 2. Identifier les composés présents dans le sirop. 3. Proposer une amélioration du système solvant si la séparation était insuffisante. **Corrigé** 1. Rf = d_composé / d_solvant - Glucose : Rf = 38 / 85 = 0,447 ≈ 0,45 - Maltose : Rf = 62 / 85 = 0,729 ≈ 0,73 - Tache 1 : 40 / 85 = 0,471 ≈ 0,47 - Tache 2 : 60 / 85 = 0,706 ≈ 0,71 2. Les Rf des taches du sirop coïncident (dans l’erreur expérimentale ±0,02) avec ceux des références → la tache 1 correspond au glucose, la tache 2 au maltose. Le sirop contient donc les deux sucres. 3. Si les taches se chevauchaient, on pourrait augmenter la polarité du solvant (par exemple passer à éthanol/acétate d’éthyle 6 : 4) afin d’accélérer la migration du maltose plus polaire et d’accroître l’écart entre les deux Rf. --- ## Erreurs fréquentes et règles de sécurité | N° | Erreur fréquente | Conséquence | Règle de prévention / bonne pratique | |----|------------------|-------------|--------------------------------------| | 1 | **Électrode de conductivité mal calibrée** (pas de rinçage à l’eau distillée entre deux mesures) | Valeurs de κ biaisées → Veq erroné → concentration fausse | Rincer l’électrode à l’eau distillée, sécher avec un chiffon non pelucheux, vérifier la constante de cellule avec une solution étalon (KCl 0,01 M) avant chaque série de mesures. | | 2 | **Ajout trop rapide du titrant** (gouttes continues au lieu de fractions de 0,5 mL) | Courbe κ vs V peu lisible, difficulté à identifier les deux droites linéaires | Utiliser une burette à arrêt précis, ajouter le titrant par aliquotes de 0,5 mL, attendre la stabilisation de κ (≥ 30 s) avant chaque lecture. | | 3 | **Utilisation d’un solvant non adapté en TLC** (ex. solvant trop polaire pour des composés très apolaires) | Les composés restent au départ ou montent avec le solvant → Rf ≈ 0 ou 1, aucune séparation | Effectuer un test de migration sur une petite bande avec différents solvants (hexane, éther de pétrole, acétate d’éthyle) et choisir celui donnant des Rf entre 0,2 et 0,8. | | 4 | **Surcharge de la colonne** (déposer trop de matière sur une colonne de faible capacité) | Élution élargie, perte de résolution, traînée des composés | Respecter la règle de charge : ≤ 5 % du poids de la phase stationnaire (ex. pour 10 g de silice, ≤ 0,5 g de mélange). Dissoudre l’échantillon dans le minimum de solvant initial. | | 5 | **Oublier de porter des lunettes de protection lors de la manipulation d’AgNO₃** | Risque de brûlures oculaires, taches noires permanentes | Toujours mettre des lunettes de sécurité avant d’ouvrir le flacon de nitrate d’argent ; garder les flacons fermés lorsqu’ils ne sont pas utilisés. | | 6 | **Évacuation inappropriée des déchets solvantés** (verser l’acétate d’éthyle dans l’évier) | Pollution de l’eau, risque d’incendie, non‑conformité réglementaire | Collecter les solvants usés dans des contenants étiquetés, les faire évacuer par un prestataire agréé conformément au décret camerounais sur la gestion des déchets dangereux. | --- *Fin du cours.*