Biochimie (partie 7/8)

## Objectifs et prérequis **À la fin de ce chapitre, l’élève sera capable de :** - Décrire la structure chimique de l’ADN et de l’ARN, expliquer les différences structurales et fonctionnelles entre les deux acides nucléiques. - Identifier les principales classes de vitamines, distinguer les vitamines hydrosolubles des liposolubles et citer leurs rôles métaboliques essentiels. - Nommer, classer et expliquer les fonctions biochimiques des vitamines hydrosolubles (vitamine C et complexe B) ainsi que leurs sources alimentaires fréquentes au Cameroun. - Réaliser un dosage simple de vitamine C par titration au bleu de méthylène et interpréter les résultats dans un contexte de contrôle qualité alimentaire. - Appliquer les règles d’hygiène et de sécurité lors de la manipulation d’échantillons biologiques et de réactifs chimiques en laboratoire de biochimie. **Prérequis :** - Notions de liaison covalente, d’hydrogène et d’interactions hydrophobes (chapitre de chimie générale). - Structure de base des monosaccharides, des acides aminés et des acides gras. - Notions de pH, de tampon et de réaction d’oxydo‑réduction. - Manipulation de base d’une pipette, d’un bécher et d’une burette (TP de chimie). --- ## Introduction contextualisée Dans les filières techniques du secondaire camerounais (série F7, spécialités Biochimie, Industries alimentaires, Laboratoire d’analyses), la maîtrise des macromolécules d’information génétique et des micronutriments essentiels est indispensable. L’ADN et l’ARN sont au cœur des techniques de diagnostic moléculaire (PCR, séquençage) utilisées dans les laboratoires de santé publique pour détecter les pathogènes (paludisme, VIH, tuberculose). Les vitamines, quant à elles, interviennent dans la qualité nutritionnelle des produits transformés (farine enrichie, jus de fruits, lait) et dans la prévention des carences chez les populations vulnérables. Ce chapitre propose une approche par compétences : l’élève apprend non seulement à connaître les structures, mais aussi à les mettre en œuvre dans des situations professionnelles réelles (contrôle de qualité, formulation de compléments alimentaires, interprétation d’analyses biochimiques). --- ## I. Leçon 19 : ADN et ARN – structure et différences ### 1. Composition chimique de base Les acides nucléiques sont des polymères de nucléotides. Chaque nucléotide comprend trois unités : - Un **phosphate** (groupement PO₄³⁻) lié au carbone 5′ du sucre. - Un **sucre pentose** : désoxyribose dans l’ADN, ribose dans l’ARN. - Une **base azotée** : adénine (A), guanine (G), cytosine (C), thymine (T) – uniquement dans l’ADN – ou uracile (U) – uniquement dans l’ARN. > **Définition** : Un nucléotide = phosphate + sucre + base azotée. ### 2. Structure primaire La chaîne polynucléotidique se forme par des liaisons phosphodiester entre le groupe phosphate du nucléotide n et le groupe hydroxyle 3′ du sucre du nucléotide n+1. La direction de synthèse est 5′ → 3′. ### 3. Structure secondaire - **ADN** : double hélice antiparallèle (brins orientés 5′→3′ et 3′→5′). Les bases s’apparient selon les règles de complémentarité de Watson‑Crick : A–T (2 liaisons H) et G–C (3 liaisons H). L’enroulement forme une hélice droite de diamètre ~2 nm, avec un pas de 3,4 nm (10 paires de bases par tour). - **ARN** : généralement simple brin, mais capable de former des structures secondaires locales (hairpins, boucles) grâce à des appariements intra‑brin (A–U, G–C). Certaines molécules d’ARN (tRNA, rRNA) adoptent des conformations tridimensionnelles complexes essentielles à leur fonction. > **Propriété** : La présence du groupe 2′‑OH du ribose rend l’ARN plus sensible à l’hydrolyse alcaline que l’ADN. ### 4. Différences fonctionnelles | Caractéristique | ADN | ARN | |-----------------|-----|-----| | Fonction principale | Stockage stable de l’information génétique | Transfert, régulation et catalyse (mRNA, tRNA, rRNA, miRNA…) | | Localisation cellulaire | Noyau (eucaryotes) / nucléoïde (procaryotes) | Nucléole, cytoplasme, ribosomes | | Stabilité | Très stable (résiste à la chaleur, aux UV) | Moins stable (sensible aux RNases) | | Type de sucre | Désoxyribose | Ribose | | Base spécifique | Thymine (T) | Uracile (U) | | Nombre de brins | Généralement double brin | Généralement simple brin (peut former des doubles brins locaux) | > **Règle de métier** : Lors de l’extraction d’ADN, on utilise des tampons contenant de l’EDTA (chélateur du Mg²⁺) pour inhiber les nucléases ; pour l’ARN, on ajoute du β-mercaptoethanol (β-ME) ou un inhibiteur de RNase et on travaille sur glace. ### 5. Exemple professionnel : dosage de l’ADN par spectrophotométrie La concentration d’ADN est estimée par l’absorbance à 260 nm (A₂₆₀). Un facteur de conversion largement utilisé est : $$ C_{\text{ADN}} (\mu g/mL) = 50 \times A_{260} \times \text{dilution} $$ **Exercice numérique** : Un extrait d’ADN dilué 1:50 donne A₂₆₀ = 0,42. Calculer la concentration initiale. $$ C = 50 \times 0,42 \times 50 = 1050 \ \mu g/mL = 1,05 \ mg/mL $$ Ce résultat permet de vérifier que le rendement d’extraction dépasse le seuil de 0,5 mg/mL requis pour une PCR de routine. --- ## II. Leçon 20 : Généralités sur les vitamines ### 1. Définition et classification Les vitamines sont des composés organiques indispensables en très faibles quantités (µg à mg/jour) pour catalyser des réactions métaboliques. Elles ne sont pas synthétisées en quantité suffisante par l’organisme et doivent être apportées par l’alimentation. - **Vitamines hydrosolubles** : soluble dans l’eau, peu stockées, excrétées par les reins. Groupe B (B₁, B₂, B₃, B₅, B₆, B₈, B₉, B₁₂) et vitamine C. - **Vitamines liposolubles** : soluble dans les lipides, stockées dans le foie et les tissus adipeux. Vitamines A, D, E, K. > **Règle de sécurité** : Les vitamines liposolubles peuvent entraîner une hypervitaminose en cas de supplémentation excessive ; respecter les AJR (Apports Journaliers Recommandés) définis par l’OMS. ### 2. Mécanisme d’action général La plupart des vitamines agissent comme **coenzymes** ou **précurseurs de coenzymes**. Par exemple : - La thiamine (B₁) forme la thiamine pyrophosphate (TPP), coenzyme des décarboxylases α‑céto. - La riboflavine (B₂) constitue le FMN et le FAD, transporteurs d’électrons. - La niacine (B₃) donne le NAD⁺/NADH et le NADP⁺/NADPH. - L’acide pantothénique (B₅) entre dans la composition du CoA. - La pyridoxine (B₆) forme le PLP, coenzyme des transaminases. - La biotine (B₈) intervient dans les carboxylation. - L’acide folique (B₉) donne le tétrahydrofolate, porteur de groupes monocarbonés. - La cobalamine (B₁₂) est coenzyme des méthyltransférases et des isomerases. - L’acide ascorbique (C) agit comme réducteur et cofactor des dioxygénases (hydroxylation de la proline, synthèse du collagène). ### 3. Facteurs influençant la biodisponibilité - **pH gastrique** : une acidité suffisante favorise l’absorption de la B₁₂ liée aux protéines. - **Présence de facteurs intrinsèques** : nécessaire à l’absorption de la B₁₂ dans l’iléon. - **Interactions alimentaires** : les phytates réduisent l’absorption du zinc et peuvent affecter la B₆ ; l’acide ascorbique améliore l’absorption du fer non héminique. - **Traitement thermique** : certaines vitamines (C, B₁) sont thermolabiles ; la cuisson à la vapeur préserve mieux leurs niveaux que l’ébullition prolongée. > **Encadré à retenir** : La vitamine C est sensible à la lumière et à l’oxygène ; stocker les jus de fruits dans des contenants opaques et réfrigérés limite sa dégradation. ### 4. Exemple professionnel : enrichissement de la farine de maïs Dans le cadre du Programme national de fortification des aliments (PNF), on ajoute de la vitamine A (palmitate de rétinyle) et des vitamines B₁, B₂, B₃, B₆, B₉ et B₁₂ à la farine de maïs destinée à la consommation urbaine. **Calcul de la dose** : Pour atteindre 0,6 mg de vitamine A/kg de farine (norme camerounaise), on doit ajouter : $$ \text{Masse de palmitate de rétinyle} = \frac{0,6 \ mg}{0,55} \approx 1,09 \ mg/kg $$ (le facteur 0,55 correspond à la fraction de rétinol actif dans le palmitate). --- ## III. Leçon 21 : Vitamines hydrosolubles ### 1. Vitamine C (acide ascorbique) - **Formule brute** : C₆H₈O₆ - **Masse molaire** : 176,12 g mol⁻¹ - **Propriétés** : acide faible (pKa₁ = 4,2 ; pKa₂ = 11,6), puissant réducteur (E⁰ = +0,06 V). - **Fonctions** : cofactor des dioxygénases (hydroxylation de la proline et de la lysine dans le collagène), absorption du fer non héminique, antioxydant physiologique. - **Sources camerounaises** : goyave, papaye, orange, piment, feuilles de manioc jeune. - **Apport journalier recommandé (AJR)** : 90 mg pour les hommes, 75 mg pour les femmes (OMS). > **Procédé de dosage** : Titration au bleu de méthylène (réduction du bleu de méthylène par l’acide ascorbique). ### 2. Complexe B – vue d’ensemble | Vitamine | Nom chimique | Coenzyme dérivée | Fonction principale | Sources camerounaises | |----------|--------------|------------------|---------------------|-----------------------| | B₁ (thiamine) | C₁₂H₁₇N₄OS⁺Cl⁻ | Thiamine pyrophosphate (TPP) | Décarboxylation des α‑cétoacides | Riz complet, maïs, haricots | | B₂ (riboflavine) | C₁₇H₂₀N₄O₆ | FMN, FAD | Transport d’électrons (déhydrogénases) | Lait, œufs, légumes verts | | B₃ (niacine) | C₆H₅NO₂ | NAD⁺/NADH, NADP⁺/NADPH | Réactions d’oxydoréduction | Arachides, poisson, foie | | B₅ (acide pantothénique) | C₉H₁₇NO₅ | Coenzyme A | Transfert d’acyle (synthèse des acides gras) | Champignons, avocats, brocoli | | B₆ (pyridoxine) | C₈H₁₁NO₃ | Pyridoxal‑5′‑phosphate (PLP) | Transamination, décarboxylation des acides aminés | Banane, poulet, pois chiches | | B₈ (biotine) | C₁₀H₁₆N₂O₃ | Biotine | Carboxylation (pyruvate carboxylase) | Jaune d’œuf, foie, noix | | B₉ (acide folique) | C₁₉H₁₉N₇O₆ | Tétrahydrofolate | Transfert de monocarbone (synthèse des nucléotides) | Légumes à feuilles, légumineuses | | B₁₂ (cobalamine) | C₆₃H₈₈CoN₁₄O₁₄P | Adénosylcobalamine, méthylcobalamine | Isomérisation, méthyltransfert | Foie, viande, poisson, lait | > **Règle d’hygiène** : Lors de la préparation de solutions de vitamines B pour des essais enzymatiques, travailler sous hotte à flux laminaire et porter des gants nitrile pour éviter la contamination microbienne. ### 3. Exemple de dosage de la vitamine C par titration au bleu de méthylène **Principe** : Le bleu de méthylène (BM) oxydé (bleu) est réduit par l’acide ascorbique (AA) en forme incolore (leuco‑méthylène). Le point d’équivalence est détecté visuellement lorsque la solution devient incolore. **Réaction** : $$ \text{C}_6\text{H}_8\text{O}_6 + \text{BM}_{ox} \rightarrow \text{C}_6\text{H}_6\text{O}_6 + \text{BM}_{red} + 2H^+ $$ **Protocole simplifié** : 1. Préparer une solution étalon de bleu de méthylène 0,02 % (p/v) dans de l’eau distillée. 2. Pipeter 10 mL du jus de fruit à tester dans un Erlenmeyer de 100 mL. 3. Ajouter 2 mL de tampon acétate pH 4,0 (pour maintenir le pH optimal de la réaction). 4. Titrer avec la solution de BM jusqu’à disparition complète de la couleur bleue. 5. Noter le volume V (mL) de BM consommé. **Calcul** : La concentration de BM est connue (C_BM). Chaque mole de BM réagit avec une mole d’AA. $$ n_{AA} = C_{BM} \times V $$ $$ [AA] (\text{mg/100 mL}) = \frac{n_{AA} \times M_{AA} \times 1000}{V_{échantillon}} \times 100 $$ où M_AA = 176,12 g mol⁻¹, V_échantillon = volume du jus utilisé (en mL). **Exemple numérique** : - C_BM = 0,02 % (p/v) = 0,2 g L⁻¹ = 0,2 g / 1000 mL = 2 × 10⁻⁴ g mL⁻¹. - Masse molaire du BM ≈ 319,85 g mol⁻¹ (C₁₆H₁₈ClN₃S). - Donc C_BM (mol L⁻¹) = (2 × 10⁻⁴ g mL⁻¹ × 1000 mL L⁻¹) / 319,85 g mol⁻¹ ≈ 6,25 × 10⁻⁴ mol L⁻¹. - Volume de BM consommé : V = 0,85 mL. - n_AA = 6,25 × 10⁻⁴ mol L⁻¹ × 0,85 × 10⁻³ L = 5,31 × 10⁻⁷ mol. - Masse d’AA = 5,31 × 10⁻⁷ mol × 176,12 g mol⁻¹ = 9,35 × 10⁻⁵ g = 0,0935 mg. - Concentration dans 10 mL de jus : 0,0935 mg / 10 mL × 100 = 0,935 mg / 100 mL. Résultat : **0,94 mg / 100 mL** de vitamine C, conforme aux valeurs attendues pour un jus de goyave frais (≈ 0,8‑1,2 mg/100 mL). > **Encadré à retenir** : La titration au bleu de méthylène doit être réalisée à l’abri de la lumière ; le bleu de méthylène photoréduit peut fausser le résultat. ### 4. Facteurs de dégradation et bonnes pratiques de stockage - **Vitamine C** : oxydation par l’O₂, catalysée par les ions Cu²⁺/Fe³⁺ ; dégradation accélérée par la chaleur et la lumière. Stockage à < 4 °C, dans des contenants opaques, addition éventuelle d’acide citrique comme chélateur. - **Vitamines B** : généralement stables à la chaleur modérée, mais sensibles à la lumière UV (B₂) et à l’alcalinité (B₁, B₂). Conservation dans des flacons amber, à température ambiante sèche. --- ## Synthèse du chapitre - **ADN** : double hélice, désoxyribose, bases A‑T, G‑C ; stockage stable de l’information génétique. - **ARN** : simple brin (peut former des structures secondaires), ribose, bases A‑U, G‑C ; rôle dans la transcription, traduction et régulation. - **Différences clés** : sucre, base spécifique (T vs U), nombre de brins, stabilité, fonction. - **Vitamines** : micronutriments essentiels, classées en hydrosolubles (B, C) et liposolubles (A, D, E, K). - **Mécanisme d’action** : majoritairement comme coenzymes (TPP, FAD, NAD, CoA, PLP, biotine, THF, B₁₂) ou comme antioxydant/reducteur (vit C). - **Vitamine C** : acide ascorbique, C₆H₈O₆, M = 176,12 g mol⁻¹, rôle dans la synthèse du collagène, absorption du fer, antioxydant. - **Dosage vitamine C** : titration au bleu de méthylène, calcul basé sur la stœchiométrie 1:1. - **Vitamines B** : tableau récapitulatif des coenzymes et fonctions. - **Bonnes pratiques** : protection contre la lumière, l’oxygène, la chaleur ; respect des AJR ; utilisation de tampons appropriés et de matériel de protection en laboratoire. --- ## Glossaire | Terme | Définition | |-------|------------| | Nucléotide | Monomère constitué d’un phosphate, d’un sucre pentose (désoxyribose ou ribose) et d’une base azotée. | | Liaison phosphodiester | Liaison covalente entre le groupe phosphate d’un nucléotide et le groupe hydroxyle 3′ du sucre du nucléotide suivant, formant le squelette des acides nucléiques. | | Double hélice | Structure en deux brins enroulés autour d’un axe commun, caractéristique de l’ADN, avec appariement de bases complémentaires. | | Coenzyme | Molécule organique non protéique qui se lie à une enzyme et participe directement à la réaction catalysée. | | Thiamine pyrophosphate (TPP) | Forme coenzymatique de la vitamine B₁, indispensable aux décarboxylases des α‑cétoacides. | | Flavin mononucléotide (FMN) | Dérivé de la riboflavine (B₂), transporteur d’électrons dans les déshydrogénases. | | Nicotinamide adénine dinucléotide (NAD⁺/NADH) | Coenzyme dérivée de la niacine (B₃), intervient dans les réactions d’oxydoréduction. | | Acide ascorbique (vitamine C) | Acide faible C₆H₈O₆, puissant réducteur, cofactor des dioxygénases et antioxydant physiologique. | | Bleu de méthylène | Colorant redox utilisé comme indicateur dans la titration de la vitamine C ; forme oxydée bleue, forme réduite incolore. | | AJR (Apports Journaliers Recommandés) | Quantités quotidiennes de nutriments estimées suffisantes pour couvrir les besoins de la plupart des individus en bonne santé. | | Photoréduction | Réduction d’une substance provoquée par l’absorption de photons (lumière), pouvant altérer des réactifs sensibles comme le bleu de méthylène. | | Chélateur | Molécule capable de former des complexes stables avec des ions métalliques, réduisant leur activité catalytique (ex. EDTA, acide citrique). | --- ## Exercices d'application corrigés ### Exercice 1 – Contrôle de qualité d’un jus d’ananas **Situation** : Vous travaillez dans un laboratoire d’analyses alimentaires au sein d’une usine de transformation de fruits à Yaoundé. Un lot de jus d’ananas doit être contrôlé pour sa teneur en vitamine C avant mise en bouteille. **Données** : - Volume de jus prélevé pour la titration : 10 mL. - Solution de bleu de méthylène utilisée : 0,02 % (p/v). - Volume de solution de bleu de méthylène consommé pour atteindre l’incolore : 0,73 mL. **Questions** : 1. Calculer la concentration de vitamine C exprimée en mg / 100 mL de jus. 2. Comparer le résultat à l’AJR de vitamine C (90 mg / jour pour un adulte) et déterminer la quantité de jus nécessaire pour couvrir 30 % de l’AJR. **Corrigé** : 1. **Calcul de la concentration** - C_BM (mol L⁻¹) = (0,02 g / 100 mL) × (1000 mL L⁻¹) / 319,85 g mol⁻¹ = 6,25 × 10⁻⁴ mol L⁻¹. - n_BM = C_BM × V = 6,25 × 10⁻⁴ mol L⁻¹ × 0,73 × 10⁻³ L = 4,56 × 10⁻⁷ mol. - n_AA = n_BM (stœchiométrie 1:1) = 4,56 × 10⁻⁷ mol. - Masse AA = n_AA × M_AA = 4,56 × 10⁻⁷ mol × 176,12 g mol⁻¹ = 8,03 × 10⁻⁵ g = 0,0803 mg. - Concentration dans 10 mL : 0,0803 mg / 10 mL × 100 = **0,803 mg / 100 mL**. 2. **Apport relatif à l’AJR** - 30 % de l’AJR = 0,30 × 90 mg = 27 mg. - Volume de jus nécessaire = (27 mg) / (0,803 mg / 100 mL) × 100 mL = 3362 mL ≈ **3,4 L** de jus. - Ainsi, boire environ 3,4 L de ce jus couvrirait 30 % des besoins journaliers en vitamine C. **Remarque professionnelle** : Un tel volume est irréaliste ; on conclut que le jus d’ananas, bien que source de vitamine C, doit être complété par d’autres aliments (goiave, papaye, supplément) pour atteindre l’AJR. --- ### Exercice 2 – Formulation d’une prémélange de vitamines B pour l’alimentation du bétail **Situation** : Une usine d’aliments pour volaille à Douala doit ajouter un prémélange de vitamines B à son concentré afin de prévenir les carences chez les poussins. Le cahier des charges exige : - Thiamine (B₁) : 2 mg kg⁻¹ d’aliment - Riboflavine (B₂) : 1,5 mg kg⁻¹ - Niacine (B₃) : 30 mg kg⁻¹ - Acide pantothénique (B₅) : 10 mg kg⁻¹ - Pyridoxine (B₆) : 5 mg kg⁻¹ - Biotine (B₈) : 0,2 mg kg⁻¹ - Acide folique (B₉) : 1 mg kg⁻¹ - Cobalamine (B₁₂) : 0,02 mg kg⁻¹ Le prémélange sera ajouté à hauteur de 0,5 % (p/p) du concentré final. **Question** : Déterminer les concentrations (en mg kg⁻¹ du prémélange) de chaque vitamine à incorporer dans le prémélange. **Corrigé** : Si le prémélange représente 0,5 % du produit final, alors 1 kg de prémélange se retrouve dans 200 kg d’aliment final (puisque 0,5 % × 200 kg = 1 kg). Ainsi, la quantité de chaque vitamine nécessaire dans 1 kg de prémélange doit être égale à la quantité requise pour 200 kg d’aliment final. - B₁ : 2 mg kg⁻¹ × 200 kg = 400 mg → **400 mg kg⁻¹ du prémélange**. - B₂ : 1,5 mg kg⁻¹ × 200 kg = 300 mg → **300 mg kg⁻¹**. - B₃ : 30 mg kg⁻¹ × 200 kg = 6000 mg → **6000 mg kg⁻¹** (6 g kg⁻¹). - B₅ : 10 mg kg⁻¹ × 200 kg = 2000 mg → **2000 mg kg⁻¹** (2 g kg⁻¹). - B₆ : 5 mg kg⁻¹ × 200 kg = 1000 mg → **1000 mg kg⁻¹** (1 g kg⁻¹). - B₈ : 0,2 mg kg⁻¹ × 200 kg = 40 mg → **40 mg kg⁻¹**. - B₉ : 1 mg kg⁻¹ × 200 kg = 200 mg → **200 mg kg⁻¹**. - B₁₂ : 0,02 mg kg⁻¹ × 200 kg = 4 mg → **4 mg kg⁻¹**. **Vérification** : La somme des masses ajoutées dans le prémélange (en g) est : 0,4+0,3+6+2+1+0,04+0,2+0,004 ≈ 9,944 g kg⁻¹, soit ≈ 1 % du prémélange. Comme le prémélange ne représente que 0,5 % de l’aliment final, la contribution réelle dans l’aliment final est bien celle demandée. --- ## Erreurs fréquentes et règles de sécurité | N° | Erreur fréquente | Conséquence | Règle de prévention / bonne pratique | |----|------------------|-------------|--------------------------------------| | 1 | Confondre les bases azotées de l’ADN et de l’ARN (ex. penser que l’ARN contient de la thymine). | Interprétation erronée des résultats d’hybridation ou de séquençage. | Mémoriser la règle : **ADN = A‑T‑G‑C**, **ARN = A‑U‑G‑C**. Utiliser un pense‑bête « T pour ADN, U pour ARN ». | | 2 | Oublier d’ajouter un chélateur (EDTA) lors de l’extraction d’ADN, entraînant la dégradation par les nucléases. | Rendement d’extraction faible, PCR non amplifiable. | Toujours préparer le tampon d’extraction avec 10 mM EDTA (pH 8,0) et travailler sur glace. | | 3 | Titrer la vitamine C à la lumière ambiante, provoquant une photoréduction du bleu de méthylène. | Sous‑estimation de la teneur en vitamine C (résultat trop bas). | Réaliser la titration dans un récipient enveloppé de papier aluminium ou dans une boîte sombre ; préparer la solution de BM juste avant l’usage. | | 4 | Utiliser un pH trop alcalin (> 8) lors de la titration de la vitamine C, ce qui accélère l’oxydation de l’AA par l’O₂ atmosphérique. | Sur‑estimation de la vitamine C (résultat trop élevé). | Maintenir le pH du milieu entre 3,5 et 4,5 (tampon acétate pH 4,0) pendant la titration. | | 5 | Négliger la dégradation de la thiamine (B₁) lors de la cuisson à l’eau bouillante prolongée dans la préparation d’aliments enrichis. | Perte de jusqu’à 70 % de la B₁, risque de carence chez les consommateurs. | Privilégier la cuisson à la vapeur ou à micro‑ondes courte ; ajouter la thiamine après cuisson si possible (formulation post‑process). | | 6 | Manipuler des solutions concentrées de vitamines liposolubles (A, D, E, K) sans protection cutanée, provoquant une irritation ou une absorption cutanée. | Risque de toxicité aiguë (hypervitaminose). | Porter des gants nitrile, des lunettes de sécurité et travailler sous hotte lorsqu’on manipule des solutions stockées à > 10 mg mL⁻¹. | --- *Fin du cours.*